Право
Навигация

 

Реклама




 

 

Ресурсы в тему

 

Реклама

Секс все чаще заменяет квартплату

Новости законодательства Беларуси

 

СНГ Бизнес - Деловой Портал. Каталог. Новости

 

Рейтинг@Mail.ru


Законодательство Российской Федерации

Архив (обновление)

 

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ТРАЛКОКСИДИМА В ВОДЕ, ПОЧВЕ, ЗЕРНЕ И СОЛОМЕ ЗЕРНОВЫХ КОЛОСОВЫХ КУЛЬТУР МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ. МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ. МУК 4.1.1230-03 (УТВ. ГЛАВНЫМ ГОСУДАРСТВЕННЫМ САНИТАРНЫМ ВРАЧОМ РФ 16.03.2003)

(по состоянию на 20 октября 2006 года)

<<< Назад


                                                             Утверждаю
                                               Главный государственный
                                                       санитарный врач
                                                 Российской Федерации,
                                                    Первый заместитель
                                              Министра здравоохранения
                                                  Российской Федерации
                                                          Г.Г.ОНИЩЕНКО
                                                    16 марта 2003 года
   
                                                       Дата введения -
                                                      1 июля 2003 года
   
               4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
                                   
            ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ТРАЛКОКСИДИМА
       В ВОДЕ, ПОЧВЕ, ЗЕРНЕ И СОЛОМЕ ЗЕРНОВЫХ КОЛОСОВЫХ КУЛЬТУР
          МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
                                   
                         МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
                            МУК 4.1.1230-03
   
       1. Сборник подготовлен: Федеральным научным центром гигиены им.
   Ф.Ф.  Эрисмана  (чл.-корр. РАМН, проф. В.Н. Ракитский,  проф.  Т.В.
   Юдина);   Московской   сельскохозяйственной  академией   им.   К.А.
   Тимирязева  (проф.  В.А. Калинин, к. хим. н. А.В.  Довгилевич)  при
   участии  Департамента  госсанэпиднадзора  Минздрава  России   (А.П.
   Веселов).  Разработчики методик контроля указаны в конце каждой  из
   них.
       2.  Методические указания рекомендованы к утверждению Комиссией
   по госсанэпиднормированию при Минздраве России.
       3.  Утверждены  и  введены  в действие Главным  государственным
   санитарным   врачом   Российской  Федерации,  Первым   заместителем
   Министра  здравоохранения  Российской  Федерации,  академиком  РАМН
   Г.Г. Онищенко 16 марта 2003 г.
       4. Введены впервые.
   
                           1. Вводная часть
   
       Фирма производитель: Зенека (Великобритания).
       Торговое название: Грасп 80% ВДГ.
       Действующее  вещество: тралкоксидим [2-1(этоксиимино)пропил]-3-
   гидрокси-5-мезитилциклогекс-2-енон (номенклатура ИЮПАК).
       Структурная формула: (не приводится).
       Эмпирическая формула: C  H  NO .
                              20 27  3
       Молекулярная масса: 329.
       Белый порошок без запаха.
       Температура плавления: 106 -С.
                                     -7
       Давление паров (20 -С): 4 х 10   Па.
       Коэффициент распределения н-октанол/вода (20 -С): 2,1.
       Растворимость в воде (22 -С): 6 мг/л    (рН 5,2)
                                     7 мг/л    (рН 6,5)
                                     8850 мг/л (рН 9,0).
       Растворимость в органических растворителях (г/л) (24 -С):
           метанол                   25
           ацетон                    89
           хлористый метилен         > 500
           толуол                    213
           гексан                    18.
       Краткая  токсикологическая  характеристика. Острая пероральная
   токсичность  для  крыс LD   = 934 - 1324 мг/кг;  острая дермальная
                            50
   токсичность  для  крыс  LD   >  2000 мг/кг;  острая  ингаляционная
                             50
   токсичность для крыс LC   = 3,5 мг/л воздуха.
                          50
       В России установлены следующие гигиенические нормативы:
       ПДК в воде - 0,008 мг/куб. дм;
       ОДК в почве - 0,06 мг/кг;
       МДУ в зерне хлебных злаков - 0,02 мг/кг.
       Область   применения.   Грасп  80%  в.д.г.   -   послевсходовый
   селективный  системный гербицид для борьбы с  сорняками  в  посевах
   пшеницы и ячменя.
   
      2. Методика определения остаточных количеств тралкоксидима
       в воде, почве, зерне и соломе зерновых колосовых культур
          методом высокоэффективной жидкостной хроматографии
                                   
                        2.1. Основные положения
                                   
       2.1.1. Принцип методики
       Методика   основана   на   определении  тралкоксидима   методом
   высокоэффективной     жидкостной     хроматографии     (ВЭЖХ)     с
   ультрафиолетовым  детектором  после  экстракции  вещества  из  воды
   хлороформом,  из  почвы  и  растительного материала  ацетонитрилом,
   очистки экстрактов перераспределением в системе вода - хлороформ  и
   на  концентрирующих  патронах-колонках Диапак-диол  и  Диапак-амин.
   Идентификация  тралкоксидима проводится по времени  удерживания,  а
   количественное определение - методом абсолютной калибровки.
       2.1.2. Избирательность метода
       Методика  специфична в присутствии пестицидов,  применяемых  на
   зерновых культурах.
       2.1.3. Метрологическая характеристика метода
       Метрологическая характеристика метода представлена в табл. 1.
   
                                                             Таблица 1
   
              МЕТРОЛОГИЧЕСКИЕ И СТАТИСТИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ
                          (Р = 0,95, N = 20)
   
   ---------T-------T-------------T----------T--------T-------------¬
   ¦Анализи-¦Предел ¦   Диапазон  ¦Среднее   ¦Стан-   ¦Доверительный¦
   ¦руемый  ¦обнару-¦ определяемых¦значение  ¦дартное ¦  интервал   ¦
   ¦объект  ¦жения, ¦концентраций,¦определе- ¦откло-  ¦  среднего   ¦
   ¦        ¦мг/л,  ¦ мг/л, мг/кг ¦ния, - %  ¦нение, S¦ результата, ¦
   ¦        ¦мг/кг  ¦             ¦          ¦        ¦    +/- %    ¦
   +--------+-------+-------------+----------+--------+-------------+
   ¦Вода    ¦0,005  ¦0,005 - 0,05 ¦83,2      ¦4,4     ¦2,1          ¦
   +--------+-------+-------------+----------+--------+-------------+
   ¦Почва   ¦0,01   ¦0,01 - 0,1   ¦81,0      ¦7,8     ¦3,7          ¦
   +--------+-------+-------------+----------+--------+-------------+
   ¦Зерно   ¦0,01   ¦0,01 - 0,1   ¦81,0      ¦7,0     ¦3,3          ¦
   +--------+-------+-------------+----------+--------+-------------+
   ¦Солома  ¦0,05   ¦0,05 - 0,5   ¦84,7      ¦8,1     ¦3,8          ¦
   L--------+-------+-------------+----------+--------+--------------
   
                  2.2. Реактивы, растворы, материалы
   
   Тралкоксидим, аналитический стандарт
   с содержанием д.в. 99,4% (Зенека)
   Ацетон, ос.ч., 9 - 5                      ТУ 2633-00-4-11291058-94
   Ацетонитрил, ос.ч., сорт 2, Криохром,
   Санкт-Петербург
   Вода бидистиллированная <*> или
   деионизированная                          ГОСТ 7602-72
   Гексан, ч.                                ТУ 6-09-3375-78
   Калия карбонат, х.ч.                      ГОСТ 4221-76
   Калия перманганат                         ГОСТ 20490-75
   Кальция хлорид, х.ч.                      ГОСТ 4161-77
   Концентрирующие патроны Диапак-диол,
   АО БиоХимМак (117899, Москва,
   Воробьевы горы, МГУ)                      ТУ 4215-002-05451931-94
   Концентрирующие патроны Диапак-амин,
   АО БиоХимМак (117899, Москва,
   Воробьевы горы, МГУ)                      ТУ 4215-002-05451931-94
   Натрия сульфат безводный, х.ч.            ГОСТ 4166-76
   Натрия тетраборат, х.ч.                   ГОСТ 4199-76
   Фосфора пентоксид, ч.                     МРТУ 6-09-5759-69
   Хлороформ медицинский                     ГОСТ 20015-74
   Эфир диэтиловый                           ГОСТ 6265-74
   Фильтры бумажные, синяя лента             ТУ 6-09-1678
   --------------------------------
       <*>  Бидистиллят  кипятят  в течение 6  часов  с  перманганатом
   калия, добавленным из расчета 1 г/л, и затем перегоняют.
   
                   2.3. Приборы, аппаратура, посуда
   
   Высокоэффективный жидкостный
   хроматограф фирмы Beckman (насос
   114 м, ультрафиолетовый детектор 166)
   или аналогичный
   Самописец регистрирующий фирмы
   Kipp@Zonen ВD41 или аналогичный
   Хроматографическая колонка фирмы
   Merck LiChrosorb NH , стальная
                      2
   250 х 4,6 мм, 10 мкм или колонка
   АО БиоХимМак (117899, Москва,
   Воробьевы горы, МГУ)
   Диасорб-130 Амин
   Шприц хроматографический фирмы
   Hamilton на 100 мкл или аналогичный
   Центрифуга Beckman, модель J2-21 или
   аналогичная
   Весы аналитические типа ВЛР-200                    ГОСТ 19401-74
   Водоструйный насос                                 ГОСТ 10696-75
   Встряхиватель механический                         ТУ 64-1-1081-73
   Вакуумный роторный испаритель ИР-1М                ТУ 25-11-917-76
   или аналогичный
   Воронка Бюхнера                                    ГОСТ 0147-73
   Воронки делительные емкостью 100,
   500 мл                                             ГОСТ 25336-82
   Воронки для фильтрования стеклянные                ГОСТ 8613-75
   Колба Бунзена                                      ГОСТ 5614-75
   Колбы круглодонные со шлифом на 10,
   100 и 250 мл                                       ГОСТ 9737-70
   Колбы конические плоскодонные на 100
   и 250 мл                                           ГОСТ 25336-82
   Колбы мерные на 100 мл                             ГОСТ 1770-74
   Пипетки мерные на 1, 2, 5 мл                       ГОСТ 20292-74Е
   Цилиндры мерные
   на 25, 50, 100, 250 мл                             ГОСТ 1770-74
   
                            2.4. Отбор проб
   
       Отбор  проб  производится  в соответствии  с  "Унифицированными
   правилами  отбора  проб сельскохозяйственной  продукции,  продуктов
   питания  и объектов окружающей среды для определения микроколичеств
   пестицидов"  (N 2051-79 от 21.08.1979). Отобранные  пробы  зерна  и
   соломы  подсушивают до стандартной влажности и хранят в  стеклянной
   или  полиэтиленовой таре при комнатной температуре. Для длительного
   хранения  пробы  почвы  подсушивают  при  комнатной  температуре  в
   отсутствие прямого солнечного света. Сухие почвенные образцы  могут
   храниться  в  течение года. Пробы воды хранят  при  температуре  не
   выше  4  -С  в течение 2 дней, при температуре -18 -С -  в  течение
   месяца.  Перед  анализом  зерно и солому размалывают  на  мельнице,
   почву просеивают через сито с отверстиями диаметром 1 мм.
   
                     2.5. Подготовка к определению
                                   
       2.5.1. Подготовка и очистка растворителей
       Гексан  сушат над хлоридом кальция, затем перегоняют  над  пен-
   токсидом  фосфора.  Диэтиловый эфир сушат  двумя  порциями  хлорида
   кальция,  периодически  встряхивая, затем перегоняют  над  хлоридом
   кальция.
       2.5.2. Приготовление стандартных растворов
       Взвешивают 100 мг тралкоксидима и растворяют его в ацетонитриле
   в  мерной  колбе  на  100 мл, получая стандартный  раствор  N  1  с
   концентрацией  тралкоксидима 1 мг/мл. Берут 1 мл этого  раствора  в
   мерную  колбу  на 100 мл и доводят до метки ацетонитрилом,  получая
   стандартный  раствор  N  2. Стандартные растворы  N  1  и  2  можно
   хранить в холодильнике в течение 3 месяцев.
       Рабочие  стандартные растворы тралкоксидима концентрацией  2,5;
   1,25;  0,5; 0,25; 0,1; 0,05 мкг/мл готовят из стандартного раствора
   N   2   методом  последовательного  разведения  ацетонитрилом.   Их
   используют  для  построения калибровочного графика  и  фортификации
   образцов   (внесения  в  образцы  для  оценки  полноты   извлечения
   тралкоксидима).  Эти  стандартные  растворы  можно  использовать  в
   течение 7 дней при хранении в холодильнике.
       2.5.3. Приготовление подвижной фазы
       Для  ВЭЖХ  анализа  тралкоксидима  используют  подвижную  фазу,
   содержащую 80% ацетонитрила и 20% воды (по объему). Перед  анализом
   фазу   дегазируют,  пропуская  через  нее  газообразный  гелий   со
   скоростью  20 мл/мин. в течение 5 мин. и помещая сосуд  с  фазой  в
   ультразвуковую ванну на 1 мин.
       2.5.4. Построение калибровочного графика
       Для   построения  калибровочного  графика  вводят  в   инжектор
   хроматографа  последовательно 5 раз по  100  мкл  каждого  рабочего
   стандартного   раствора,  измеряют  высоты   или   площади   пиков,
   рассчитывают  среднее  значение высоты или их  площади  для  каждой
   концентрации  и строят график зависимости высоты или  площади  пика
   от концентрации тралкоксидима.
       2.5.5. Кондиционирование патронов-колонок Диапак-диол и Диапак-
   амин
       Патрон  устанавливают на алонж с отводом для вакуума, сверху  в
   патрон  вставляют шприц с разъемом типа Люер объемом  не  менее  10
   мл,  который  используют как емкость для элюента. Патрон  промывают
   два раза 3 мл гексана.
       Промывку  проводят под вакуумом непосредственно перед  очисткой
   экстрактов  образцов со скоростью не более 2 мл/мин.,  не  допуская
   высыхания поверхности патрона.
       2.5.6. Проверка хроматографического поведения тралкоксидима  на
   концентрирующих патронах-колонках Диапак
       2.5.6.1. Диапак-диол. Приливают в круглодонную колбу на 10 мл 1
   мл  стандартного  раствора тралкоксидима в гексане концентрацией  1
   мкг/мл,  добавляют  3  мл смеси гексан-диэтиловый  эфир  (90:10)  и
   наносят  на кондиционированный патрон. Обмывают колбу 6 мл этой  же
   смеси  и также наносят на патрон. Элюирование проводят под вакуумом
   со  скоростью  не  более  1 мл/мин. Элюат собирают  в  круглодонную
   испарительную  колбу,  упаривают его, остаток  растворяют  в  1  мл
   подвижной  фазы для ВЭЖХ и анализируют на содержание  тралкоксидима
   по  п.  2.7,  которое  должно составлять около 100%  от  внесенного
   количества.
       2.5.6.2. Диапак-амин. Наносят на кондиционированный патрон 1 мл
   стандартного  раствора  тралкоксидима  в  гексане  концентрацией  1
   мкг/мл  и  элюируют его 10 мл ацетона со скоростью 1 мл/мин.  Элюат
   собирают в испарительную колбу, упаривают, остаток растворяют  в  1
   мл   подвижной   фазы   для  ВЭЖХ  и  анализируют   на   содержание
   тралкоксидима  по п. 2.7, которое должно составлять около  100%  от
   внесенного количества.
   
                  2.6. Описание методики определения
                                   
       2.6.1. Вода
       Образец  предварительно отфильтрованной  воды  объемом  100  мл
   переносят в делительную воронку на 500 мл, добавляют 30 мл  0,01  М
   раствора  тетрабората  натрия  и  трижды  экстрагируют  хлороформом
   порциями по 30 мл, встряхивая каждый раз воронку в течение  2  мин.
   После  полного  разделения  слоев нижнюю  органическую  фазу  через
   воронку  с  прокаленным сернокислым натрием сливают в испарительную
   круглодонную  колбу. Объединенный хлороформовый экстракт  упаривают
   на  вакуумном роторном испарителе при 40 -С до объема примерно 1 мл
   и   остатки   раствора  высушивают  током  азота.   Сухой   остаток
   растворяют  в  5  мл  подвижной фазы  для  ВЭЖХ  и  анализируют  на
   содержание тралкоксидима по п. 2.7.
       2.6.2. Почва
       2.6.2.1.  Экстракция  и предварительная очистка.  В  коническую
   плоскодонную  колбу  на  100  мл  помещают  навеску  почвы  20   г,
   приливают  40  мл  ацетонитрила и встряхивают  в  течение  45  мин.
   Экстракт  фильтруют под вакуумом на воронке Бюхнера через  бумажный
   фильтр "синяя лента". К остатку почвы в колбе добавляют еще  40  мл
   ацетонитрила  и  процедуру экстракции повторяют. Почву  на  фильтре
   промывают  20 мл ацетонитрила. Из объединенного экстракта  отбирают
   аликвоту  50  мл,  эквивалентную  10  г  почвы,  добавляют  15   мл
   деионизированной  воды  и раствор упаривают на  вакуумном  роторном
   испарителе   при   40  -С  до  водного  остатка.   Водный   остаток
   количественно переносят в делительную воронку на 100 мл,  добавляют
   20  мл  хлороформа и встряхивают воронку в течение  1  мин.  Нижнюю
   органическую  фазу через воронку с прокаленным сернокислым  натрием
   сливают  в  испарительную круглодонную колбу. Процедуру  экстракции
   хлороформом  повторяют  еще  два раза.  Объединенный  хлороформовый
   экстракт  упаривают  на вакуумном роторном  испарителе  при  40  -С
   примерно  до 1 мл и его остатки высушивают током азота.  Дальнейшую
   очистку проводят по п. 2.6.2.2.
       2.6.2.2. Очистка экстрактов на патронах-колонках Диапак.  Сухой
   остаток  растворяют в 4 мл смеси гексан-диэтиловый эфир  (90:10)  и
   наносят  на кондиционированный патрон Диапак-диол. Затем 6 мл  этой
   же  смеси обмывают колбу и также наносят на патрон. Элюат собирают,
   наносят   на   кондиционированный  патрон   Диапак-амин   и   после
   пропускания  через  патрон  отбрасывают. Тралкоксидим  элюируют  из
   патрона  Диапак-амин  10  мл  ацетона в круглодонную  испарительную
   колбу.   Ацетоновый   раствор  упаривают  на   вакуумном   роторном
   испарителе  при  40 -С до объема примерно 1 мл, который  высушивают
   током  азота.  Сухой остаток растворяют в 1 мл подвижной  фазы  для
   ВЭЖХ и анализируют по п. 2.7.
       Нанесение  растворов  на  патроны и  элюирование  проводят  под
   вакуумом со скоростью не более 1 мл/мин.
       2.6.3. Зерно и солома
       2.6.3.1.  Экстракция  и предварительная очистка.  В  коническую
   колбу  на  250 мл помещают измельченный образец зерна  (10  г)  или
   соломы  (5 г). Приливают 50 мл (для соломы - 80 мл) ацетонитрила  и
   встряхивают  в течение 30 мин. Экстракт фильтруют под  вакуумом  на
   воронке  Бюхнера  через  бумажный фильтр "синяя  лента".  Процедуру
   экстракции  повторяют еще раз, и фильтруют экстракт  через  тот  же
   фильтр.   Растительные   остатки  на  фильтре   промывают   20   мл
   ацетонитрила.  Экстракты объединяют, берут аликвоту  -  60  мл  для
   зерна  и  90  мл для соломы, добавляют к ним 15 мл деионизированной
   воды  и  упаривают на вакуумном роторном испарителе при  40  -С  до
   водного остатка. Далее остаток подвергают центрифугированию (2  -С,
   20000  об./мин., 15 мин.) и фильтруют через бумажный фильтр  "синяя
   лента"  в делительную воронку на 100 мл, добавляют 20 мл хлороформа
   и  встряхивают  воронку в течение 1 мин. Нижнюю  органическую  фазу
   через   воронку  с  прокаленным  сернокислым  натрием   сливают   в
   испарительную круглодонную колбу. Процедуру экстракции  хлороформом
   повторяют   еще  два  раза.  Объединенный  хлороформовый   экстракт
   упаривают на вакуумном роторном испарителе при 40 -С примерно до  1
   мл  и  его  остатки  высушивают  током  азота.  Дальнейшую  очистку
   проводят по п. 2.6.2.2, а анализ на хроматографе - по п. 2.7.
   
                   2.7. Условия хроматографирования
                                   
   Высокоэффективный жидкостный
   хроматограф фирмы Beckman (насос
   114 м, ультрафиолетовый детектор 166)
   или аналогичный
   Самописец регистрирующий фирмы
   Kipp@Zonen BD41 или аналогичный
   Хроматографическая колонка фирмы
   Merck Lichrosorb NH  стальная 250 х 4,6 мм,
                      2
   10 мкм или колонка АО БиоХимМак
   (117899, Москва, Воробьевы горы, МГУ)
   Диасорб-130 Амин
   Объем вводимой пробы:                           100 мкл
   Подвижная фаза:                                 ацетонитрил - вода
                                                   (80:20, по объему)
   Скорость потока подвижной фазы:                 0,8 мл/мин.
   Длина волны детектора:                          280 нм
   Чувствительность УФ-детектора:                  0,01 AUFS
   Скорость протяжки ленты самописца:              2 мм/мин.
   Температура колонки:                            комнатная
   Время выхода тралкоксидима:                     7,5 - 8,5 мин.
   
                  2.8. Обработка результатов анализа
   
       Содержание   тралкоксидима  рассчитывают   методом   абсолютной
   калибровки по формуле:
   
                                H  x C   x V
                                 1    ст
                            C = ------------ x p,
                                100 H   x m
                                     ст
   
       где:
       С  -  содержание   тралкоксидима  в   анализируемом    объекте
   (мг/кг, мг/л);
       Н  - высота пика образца (мм);
        1
       Н   - высота пика стандарта (мм);
        ст
       С   - концентрация    стандартного   раствора    тралкоксидима
        ст
   (мкг/мл);
       V - объем экстракта (мл);
       m - масса или объем анализируемого образца (г, мл);
       р - содержание тралкоксидима в аналитическом стандарте (%).
   
                  3. Требования техники безопасности
   
       Необходимо  соблюдать  общепринятые  правила  безопасности  при
   работе с органическими растворителями и токсичными веществами.
   
                   4. Контроль погрешности измерений
   
       Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости  измерений
   осуществляется  в  соответствии с рекомендациями МИ  2335-95  "ГСИ.
   Внутренний    контроль    качества   результатов    количественного
   химического анализа".
   
                            5. Разработчики
   
       Калинин В.А., профессор, канд. с.-х. наук, Горбатов В.С.,  вед.
   научн.  сотр.,  канд.  биол.  наук, Бондарева  Т.А.,  научн.  сотр.
   Московская   сельскохозяйственная  академия  им.  К.А.  Тимирязева.
   127550,  Москва,  Тимирязевская ул., д.  53/1,  УНКЦ  "Агроэкология
   пестицидов и агрохимикатов".
   
   

<<< Назад

 
Реклама

Новости


Реклама

Новости сайта Тюрьма


Hosted by uCoz