Утверждаю
Главный государственный
санитарный врач
Российской Федерации,
Первый заместитель
Министра здравоохранения
Российской Федерации
Г.Г.ОНИЩЕНКО
16 марта 2003 года
Дата введения -
1 июля 2003 года
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
ИЗМЕРЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИЙ ТРАЛКОКСИДИМА В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ
ЗОНЫ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
МУК 4.1.1231-03
1. Сборник подготовлен: Федеральным научным центром гигиены им.
Ф.Ф. Эрисмана (чл.-корр. РАМН, проф. В.Н. Ракитский, проф. Т.В.
Юдина); Московской сельскохозяйственной академией им. К.А.
Тимирязева (проф. В.А. Калинин, к. хим. н. А.В. Довгилевич) при
участии Департамента госсанэпиднадзора Минздрава России (А.П.
Веселов). Разработчики методик контроля указаны в конце каждой из
них.
2. Методические указания рекомендованы к утверждению Комиссией
по госсанэпиднормированию при Минздраве России.
3. Утверждены и введены в действие Главным государственным
санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем
Министра здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМН
Г.Г. Онищенко 16 марта 2003 г.
4. Введены впервые.
1. Вводная часть
Фирма-производитель: Зенека (Великобритания).
Торговое название: Грасп 80% ВДГ.
Действующее вещество: тралкоксидим [2-1(этоксиимино)пропил]-3-
гидрокси-5-мезитилциклогекс-2-енон (номенклатура ИЮПАК).
Структурная формула: (не приводится).
Эмпирическая формула: C H NO .
20 27 3
Молекулярная масса: 329.
Белый порошок без запаха.
Температура плавления: 106 -С.
-7
Давление паров (20 -С): 4 х 10 Па.
Коэффициент распределения н-октанол/вода (20 -С): 2,1.
Растворимость в воде (22 -С): 6 мг/л (рН 5,2)
7 мг/л (рН 6,5)
8850 мг/л (рН 9,0).
Растворимость в органических растворителях при 24 -С (г/л):
метанол 25
ацетон 89
хлористый метилен > 500
толуол 213
гексан 18
Может присутствовать в воздухе рабочей зоны в виде аэрозоля.
Краткая токсикологическая характеристика. Острая пероральная
токсичность для крыс LD = 934 - 1324 мг/кг; острая дермальная
50
токсичность для крыс LD > 2000 мг/кг; острая ингаляционная
50
токсичность для крыс LC = 3,5 мг/л воздуха.
50
ОБУВ в воздухе рабочей зоны - 0,4 мг/куб. м.
Область применения препарата. Послевсходовый селективный
системный гербицид для борьбы с сорняками в посевах пшеницы и
ячменя.
2. Методика измерения концентраций тралкоксидима
в воздухе рабочей зоны методом высокоэффективной
жидкостной хроматографии
2.1. Основные положения
2.1.1. Принцип методики
Методика основана на определении вещества с помощью
высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с
ультрафиолетовым детектором.
Отбор проб воздуха осуществляется концентрированием аэрозоля на
бумажные фильтры "синяя лента". Идентификация тралкоксидима
проводится по времени удерживания, количественное определение -
методом абсолютной калибровки.
2.1.2. Избирательность метода
В предлагаемых условиях метод специфичен в присутствии
компонентов препаративной формы, в том числе смачивателя TF 8035,
а также пестицидов, применяемых на зерновых культурах.
2.1.3. Метрологическая характеристика метода (Р = 0,95)
Число параллельных определений 6
Предел обнаружения в хроматографируемом
объеме 5 нг
Предел обнаружения в воздухе при отборе
20 куб. дм воздуха 0,005 мг/куб. м
Диапазон определяемых концентраций 0,005 - 0,1 мг/куб. м
Среднее значение определения 94,77%
Стандартное отклонение (S) 11,10%
Относительное стандартное отклонение (DS) 4,82%
Доверительный интервал среднего 12,39%
Суммарная погрешность измерения не превышает 24%
2.2. Реактивы, растворы и материалы
Тралкоксидим, аналитический стандарт
с содержанием д.в. 99,4%, (Зенека)
Ацетон, ч.д.а. ГОСТ 2603-79
Ацетонитрил для жидкостной хроматографии ТУ 6-09-4326-76
Вода бидистиллированная <*>
или деионизованная
Хлороформ, х.ч. ТУ 6-09-4263-76
Фильтры бумажные "синяя лента",
предварительно промытые ацетоном,
затем хлороформом ТУ 6-09-26-78
--------------------------------
<*> Бидистиллят кипятят в течение 6 часов с перманганатом
калия, добавленным из расчета 1 г/л, и затем перегоняют.
2.3. Приборы, аппаратура, посуда
Высокоэффективный жидкостный
хроматограф фирмы Beckman (насос 114 м,
ультрафиолетовый детектор 166)
или аналогичный
Хроматографическая колонка стальная,
длиной 15 см, внутренним диаметром 4 мм,
содержащая Диасорб-130 Амин, 7 мкм (АО
БиоХимМак, 117899, Москва, Воробьевы
горы, МГУ)
Шприц хроматографический фирмы
Hamilton на 100 мкл или аналогичный
Аспирационное устройство типа ЭА-1 ТУ 25-11-1414-78
или аналогичное
Барометр ТУ 2504-1797-75
Вакуумный роторный испаритель ИР-1М ТУ 25-11-917-76
или аналогичный
Весы аналитические типа ВЛР-200 ГОСТ 19401-74
Водоструйный насос ГОСТ 10696-75
Встряхиватель механический ТУ 64-1-1081-73
Термометр лабораторный, цена деления
1 -С, пределы измерения 0 - 55 -С ГОСТ 215-73Е
Воронки химические конусные диаметром
34 - 40 мм ГОСТ 25336-82Е
Колбы мерные на 50, 100 и 1000 мл ГОСТ 1770-74
Колбы круглодонные со шлифом на 100 мл ГОСТ 9737-70
Пипетки на 1, 2, 5 и 10 мл ГОСТ 20292-74
Пробирки центрифужные на 10 мл ГОСТ 25336-82Е
Стаканы химические на 100 мл ГОСТ 25336-82Е
Цилиндры мерные на 10 и 200 мл ГОСТ 1770-74
Груша резиновая
Фильтродержатели
Стеклянные палочки
2.4. Отбор проб
Отбор проб воздуха рабочей зоны следует осуществлять в
соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 "ССБТ. Общие
санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны".
Воздух со скоростью 5 л/мин. пропускают через фильтр "синяя
лента", помещенный в фильтродержатель.
Для измерения концентрации вещества на уровне 0,005 мг/куб. м
следует отобрать 20 л воздуха.
Фильтры с отобранными пробами, помещенные в герметически
закрываемые склянки, можно хранить в морозильной камере при
температуре -12 -С в течение 30 дней, в холодильнике при 4 - 6 -С
- в течение 5 дней.
2.5. Подготовка к определению
2.5.1. Очистка растворителей
Органические растворители перед началом работы очищают, сушат и
перегоняют в соответствии с типовыми методиками. Ацетонитрил сушат
над пентоксидом фосфора и перегоняют, отогнанный растворитель
повторно перегоняют над углекислым калием. Ацетон очищают
перегонкой.
2.5.2. Подготовка подвижной фазы
Для ВЭЖХ анализа тралкоксидима используют подвижную фазу,
содержащую 80% ацетонитрила и 20% воды (по объему). Перед анализом
фазу дегазируют, пропуская через нее газообразный гелий со
скоростью 20 л/мин. в течение 5 мин. или помещая сосуд с фазой в
ультразвуковую ванну на 1 мин.
2.5.3. Кондиционирование колонки
Промыть колонку для ВЭЖХ подвижной фазой ацетонитрил - вода
(80:20, по объему) при скорости подачи растворителя 1 мл/мин. в
течение 30 - 45 мин. до получения стабильной базовой линии.
2.5.4. Приготовление стандартных растворов
Взвешивают 100 мг тралкоксидима и растворяют его в ацетонитриле
в мерной колбе на 100 мл, получая стандартный раствор N 1 с
концентрацией 1 мг/мл. Берут 1 мл этого раствора в мерную колбу на
100 мл и доводят до метки ацетонитрилом, получая стандартный
раствор N 2 с концентрацией 10 мкг/мл. Стандартные растворы N 1 и
2 можно хранить в холодильнике в течение 3-х месяцев.
Рабочие стандартные растворы тралкоксидима концентрацией 1,0;
0,5; 0,25; 0,1; 0,05 мкг/мл готовят из стандартного раствора N 2
методом последовательного разведения подвижной фазой для ВЭЖХ.
Данные стандартные растворы можно использовать в течение 7 дней
при хранении в холодильнике.
2.5.5. Построение калибровочного графика
Для построения калибровочного графика вводят в инжектор
хроматографа последовательно 5 раз по 100 мкл каждого рабочего
стандартного раствора, измеряют высоты или площади пиков,
рассчитывают их средние значения для каждой концентрации и строят
график зависимости высоты или площади пика от концентрации
тралкоксидима.
2.6. Описание определения
Фильтр с отобранной пробой переносят в химический стакан
вместимостью 100 мл, заливают 10 мл хлороформа, помещают на
встряхиватель на 7 - 10 мин. Растворитель сливают, отжимая фильтр
стеклянной палочкой. Фильтр еще дважды обрабатывают новыми
порциями хлороформа объемом 10 мл.
Объединенный экстракт упаривают в круглодонной колбе на
вакуумном роторном испарителе при 40 -С до объема примерно 1 мл,
остаток раствора высушивают током азота. Сухой остаток растворяют
в 2 мл подвижной фазы для ВЭЖХ, фильтруют и анализируют на
содержание тралкоксидима по п. 2.7.
2.7. Условия хроматографирования
Высокоэффективный жидкостный
хроматограф фирмы Beckman (насос
114 м, ультрафиолетовый детектор 166)
Хроматографическая колонка стальная,
длиной 15 см, внутренним диаметром 4 мм,
содержащая Диасорб-130 Амин, 7 мкм
Объем вводимой пробы 100 мкл
Подвижная фаза ацетонитрил - вода
= 80:20 (по объему)
Скорость потока элюента 0,8 мл/мин.
Длина волны 280 нм
Чувствительность УФ-детектора 0,01 AUFS
Температура колонки комнатная
Время выхода тралкоксидима 7,5 - 8,5 мин.
Линейный диапазон детектирования 5 - 100 нг
Образцы, дающие пики большие, чем
стандартный раствор с концентрацией
1,0 мкг/мл, разбавляют подвижной
фазой для ВЭЖХ.
Альтернативная неподвижная фаза:
Хроматографическая колонка стальная
(15 х 4 мм), заполненная
Диасорбом 130-С8Т (7 мкм)
Условия хроматографирования те же
Время выхода тралкоксидима около 7 мин.
2.8. Обработка результатов анализа
Концентрацию тралкоксидима рассчитывают методом абсолютной
калибровки по формуле:
W
Х = С --,
V
где:
Х - концентрация тралкоксидима в пробе воздуха, мг/куб. м;
С - концентрация тралкоксидима в хроматографируемом растворе,
найденная по калибровочному графику, мкг/мл;
W - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования,
мл;
V - объем пробы воздуха, отобранного для анализа, приведенного
к стандартным условиям (давление 760 мм рт. ст., температура 20
-С), куб. дм.
3. Требования техники безопасности
Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при
работе с органическими растворителями, токсичными веществами,
электронагревательными приборами.
4. Контроль погрешности измерений
Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений
осуществляется в соответствии с рекомендациями МИ 2335-95 "ГСИ.
Внутренний контроль качества результатов количественного
химического анализа".
5. Разработчики
Калинин В.А., проф., к. с.-х. н., Калинина Т.С. с.н.с., к. с.-
х. н., Довгилевич Е.В., с.н.с., канд. б. н., Довгилевич А.В.,
с.н.с., к. хим. н. Московская сельскохозяйственная академия им.
К.А. Тимирязева. 127550, Москва, Тимирязевская ул., д. 53/1, УНКЦ
"Агроэкология пестицидов и агрохимикатов". Телефон/факс: 976-43-
26.
|
