Утверждаю
Главный государственный
санитарный врач
Российской Федерации,
Первый заместитель
Министра здравоохранения
Российской Федерации
Г.Г.ОНИЩЕНКО
16 марта 2003 года
Дата введения -
1 июля 2003 года
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
ИЗМЕРЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИЙ НИКОСУЛЬФУРОНА В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ
ЗОНЫ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
МУК 4.1.1227-03
1. Сборник подготовлен: Федеральным научным центром гигиены им.
Ф.Ф. Эрисмана (проф. Т.В. Юдина); Московской сельскохозяйственной
академией им. К.А. Тимирязева (проф. В.А. Калинин) при участии
Департамента госсанэпиднадзора Минздрава России (А.П. Веселов).
Разработчики методик контроля указаны в конце каждой из них.
2. Методические указания рекомендованы к утверждению Комиссией
по госсанэпиднормированию при Минздраве России.
3. Утверждены и введены в действие Главным государственным
санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем
Министра здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМН
Г.Г. Онищенко 16 марта 2003 года.
4. Введены впервые.
1. Вводная часть
Фирма-производитель: Зенека (Великобритания).
Торговое наименование препарата: АКЦЕНТ, НИССХИН.
Название действующего вещества по номенклатуре ИСО:
никосульфурон.
Название действующего вещества по номенклатуре ИЮПАК: 2-(4,6-
диметоксипиримидин-2-илкарбомоил-сульфамоил)-N,N-
диметилникотинамид.
Структурная формула (не приводится).
Эмпирическая формула: C H N O S.
15 18 6 6
Молекулярная масса: 410,40.
Химически чистый никосульфурон представляет собой бесцветное
кристаллическое вещество без запаха.
Температура плавления: 172 - 173 -С.
Растворимость: хорошо растворим в дихлорметане, толуоле,
хлороформе; удовлетворительно - в ацетонитриле, ацетоне, этаноле;
практически не растворим в гексане; растворимость в воде (в мг/л):
44 (рН 3,5) и 120000 (рН 7,0).
Область применения препарата: никосульфурон - послевсходовый
гербицид для борьбы с широким кругом одно- и многолетних сорняков.
2. Методика измерения концентраций никосульфурона
в воздухе рабочей зоны и атмосферном воздухе методом
высокоэффективной жидкостной хроматографии
2.1. Основные положения
2.1.1. Принцип методики
Методика основана на определении никосульфурона с помощью
высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) на обращенной
фазе с ультрафиолетовым детектором.
Отбор воздуха осуществляется концентрированием аэрозоля на
бумажные фильтры "синяя лента".
Количественное определение проводится методом абсолютной
калибровки.
2.1.2. Избирательность метода
В предлагаемых условиях метод специфичен в присутствии
компонентов препаративной формы, а также пестицидов, применяемых в
интенсивной технологии выращивания сельскохозяйственных культур
(хлор- и фосфорорганические пестициды, симм-триазины,
фенилмочевины, тио- и дитиокарбоматы).
2.1.3. Метрологическая характеристика метода (Р = 0,95)
Число параллельных определений - 6
Предел обнаружения в хроматографируемом объеме - 5,0 нг
Предел обнаружения - 0,01 мг/куб. м (при отборе 25 л воздуха)
Диапазон определяемых концентраций - 0,01 - 0,10 мг/куб. м
Среднее значение определения - 95,02%
Стандартное отклонение (S) - 1,18%
Относительное стандартное отклонение (DS) - 0,67%
Доверительный интервал среднего - 1,72%
Суммарная погрешность измерения не превышает 14%
2.2. Реактивы, материалы и растворы
Никосульфурон с содержанием д.в. 94,8%
Ацетонитрил для хроматографии, х.ч. ТУ 6-09-4326-76
Вода бидистиллированная, деионизованная или
перегнанная над КМnО
4
Хлороформ (Фармакопея СССР)
Кислота уксусная, ледяная ГОСТ 61-75
Бумажные фильтры "синяя лента", обеззоленные
предварительно промытые хлороформом ТУ 6-09-2678-77
2.3. Приборы, аппаратура, посуда
Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым
детектором с переменной длиной волны
Shimadzu (Япония) или аналогичный
Хроматографическая колонка стальная длиной
25 см, внутренним диаметром 4,6 мм,
содержащая Lichrosorb RP-8 или Hipersil
ODS (альтернативная фаза), зернением 5 мкм
Шприц для ввода образцов для жидкостного
хроматографа
Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М ТУ 25-11-917-74
или аналогичный
Весы аналитические ВЛА-200 ГОСТ 34104-80Е
или аналогичные
Насос водоструйный ГОСТ 10696-75
Печь муфельная
Аспирационное устройство достаточной
разрешающей способности (типа ЭА-1) ТУ 25-11-1414-78
Барометр-анероид М-67 ТУ 2504-1797-75
Термометр лабораторный шкальный ТЛ-2,
пределы измерения 0 - 55 -С,
цена деления 1 -С ГОСТ 215-73Е
Колбы мерные вместимостью 100 и 1000 мл ГОСТ 1770-74
Цилиндры мерные вместимостью 10, 500 и
1000 мл ГОСТ 1770-74Е
Колбы грушевидные со шлифом вместимостью
100 мл ГОСТ 10394-72
Стаканы химические вместимостью 100 мл ГОСТ 25336-82Е
Пипетки вместимостью 0,1; 1,0 и 10 мл ГОСТ 20292-74
Фильтродержатели
Стеклянные палочки
Воронки конические диаметром 30 - 37 мм ГОСТ 25336-82Е
2.4. Отбор проб
Отбор проб воздуха рабочей зоны проводят в соответствии с
требованиями ГОСТ 12.1.005-88 "ССБТ. Общие санитарно-гигиенические
требования к воздуху рабочей зоны".
В течение 15 мин. последовательно отбирают 3 пробы, для чего
воздух аспирируют в течение 5 мин. с объемным расходом 1 - 5 куб.
дм/мин. через бумажный фильтр "синяя лента".
Фильтры с отобранными пробами, упакованные в полиэтиленовые
пакеты, можно хранить в холодильнике не более 3 дней.
2.5. Подготовка к определению
2.5.1. Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ
Отмеряют 300 мл ацетонитрила, прозрачного при 254 нм, переносят
в колбу на 1000 мл, добавляют 5 мл уксусной кислоты и 695 мл
бидистиллированной воды, фильтруют, дегазируют.
2.5.2. Кондиционирование колонки
Промыть колонку для ВЭЖХ системой ацетонитрил-вода-уксусная
кислота (300:695:5) в течение 30 мин. при скорости подачи
растворителя 1 мл/мин. Включить детектор и подождать стабилизации
базовой линии (5 - 15 мин.).
2.5.3. Приготовление стандартных растворов
Стандартный раствор никосульфурона с содержанием 100 мкг/мл
готовят растворением 0,01 г вещества в ацетонитриле в мерной колбе
на 100 мл. Раствор хранится в холодильнике не более 10 дней.
Рабочие стандартные растворы с концентрацией 0,25; 0,5; 1,0;
1,5; 2,5 мкг/мл готовят из раствора, содержащего 100 мкг/мл
никосульфурона, соответствующим последовательным разбавлением
подвижной фазой для ВЭЖХ (п. 2.5.1). Растворы немедленно после
приготовления помещаются в холодильник, где хранятся не более 3
суток.
2.5.4. Построение градуировочного графика
Для построения градуировочного графика в инжектор хроматографа
вводят по 20 мкл рабочего стандартного раствора никосульфурона с
концентрацией 0,25; 0,5; 1,0; 1,5; 2,5 мкг/мл.
Осуществляют не менее 5 параллельных измерений. Находят среднее
значение высоты хроматографического пика для каждой концентрации.
Строят градуировочный график зависимости высоты
хроматографического пика в мм от концентрации никосульфурона в
растворе в мкг/мл.
2.6. Описание определения
Бумажный фильтр с отобранной пробой переносят в химический
стакан вместимостью 100 мл, заливают 10 мл хлороформа, оставляют
на 2 - 3 мин. Растворитель сливают, отжимая фильтр стеклянной
палочкой. Фильтр дважды обрабатывают новыми порциями хлороформа
объемом 10 мл.
Далее объединенный экстракт упаривают в грушевидных колбах на
ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 45 -С
почти досуха, оставшийся растворитель отдувают потоком теплого
воздуха. Остаток растворяют в 1 мл подвижной фазы для ВЭЖХ (2.5.1)
и анализируют по п. 2.7.
2.7. Условия хроматографирования
Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором Shimadzu
(Япония)
Колонка стальная длиной 25 см, внутренним диаметром 4,6 мм
Температура колонки: комнатная
Подвижная фаза: ацетонитрил-вода-уксусная кислота (300:695:5,
по объему)
Скорость потока элюента: 1 мл/мин.
Рабочая длина волны: 254 нм
Чувствительность: 0,02 ед. абсорбции на шкалу
Объем вводимой пробы: 20 мкл
2.7.1. Неподвижная фаза: Lichrosorb RP 8, зернением 5 мкм
Время выхода никосульфурона: 6,5 - 7 мин.
2.7.2. Альтернативная неподвижная фаза:
Hipersil ODS, зернением 5 мкм
Время выхода никосульфурона: около 10 мин.
Линейный диапазон детектирования: 5 - 50 нг
Образцы, дающие пики большие чем стандартный раствор с
концентрацией 2,5 мкг/мл, разбавляют подвижной фазой для ВЭЖХ.
2.8. Обработка результатов анализа
Содержание никосульфурона рассчитывают методом абсолютной
калибровки по формуле:
H х A х W
1
X = ----------,
H х V
0
где:
Х - содержание никосульфурона в пробе воздуха, мг/куб. м;
Н - высота пика стандарта, мм;
0
Н - высота пика образца, мм;
1
А - концентрация стандартного раствора, мкг/мл;
W - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования,
мл;
V - объем пробы воздуха, отобранного для анализа, приведенного
к стандартным условиям (давление 760 мм рт. ст., температура
20 -С), л:
P
V = 0,383 ------- х u х t,
273 + T
где:
Т - температура воздуха при отборе пробы (на входе в
аспиратор), -С;
Р - атмосферное давление при отборе пробы, мм рт. ст.;
u - расход воздуха при отборе пробы, куб. дм/мин.;
t - длительность отбора пробы, мин.
3. Требования техники безопасности
Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при
работе с органическими растворителями, токсичными и
легковоспламеняющимися веществами, электронагревательными
приборами, сжатыми газами.
4. Контроль погрешности измерений
Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений
осуществляется в соответствии с рекомендациями МИ 2335-95. ГСИ
"Внутренний контроль качества результатов количественного
химического анализа".
5. Разработчики
Калинин В.А., Довгилевич Е.В., Калинина Т.С, Довгилевич А.В.
Московская сельскохозяйственная академия имени К.А. Тимирязева.
127550, Москва, Тимирязевская ул., д. 53/1, УНКЦ "Агроэкология
пестицидов и агрохимикатов". Телефон/факс: 976-43-26.
|
